| 中文名称: | Refametinib | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| 英文名称: | Refametinib | ||||
| 别名: | 瑞法替尼 BAY 869766; RDEA119 | ||||
| CAS No: | 923032-37-5 | 分子式: | C19H20F3In2O5S | 分子量: | 572.34 |
| CAS No: | 923032-37-5 | ||||
| 分子式: | C19H20F3In2O5S | ||||
| 分子量: | 572.34 | ||||
| MDL: | MFCD18633256 | ||||
包装规格：
2mg 5mg 10mg 25mg 50mg 100mg in glass bottle
产品简介：
一种口服有效，非ATP竞争的，选择性 MEK1/MEK2 变构抑制剂，IC50 分别为 19 nM 和 47 nM。
溶解性：
DMSO :≥ 31 mg/mL(54.16 mM)
储备液保存：
-80°C, 2 years
-20°C, 1 year
-20°C, 1 year
体内实验：
1、请依序添加每种溶剂：10% DMSO→90% (20% SBE-β-CD in Saline)
Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (4.37 mM); 澄清溶液
此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液。
以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液 中，混合均匀。
2、请依序添加每种溶剂：10% DMSO→90% Corn Oil
Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (4.37 mM); 澄清溶液
此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液，此方案实验周期在半个月以上的动物实验酌情使用。
以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL玉米油中，混合均匀。
＜1mg/ml表示微溶或不溶。
普西唐提供的所有化合物浓度为内部测试所得，实际溶液度可能与公布值有所偏差，属于正常的批间细微差异现象。
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；⼀旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (4.37 mM); 澄清溶液
此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液。
以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液 中，混合均匀。
2、请依序添加每种溶剂：10% DMSO→90% Corn Oil
Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (4.37 mM); 澄清溶液
此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液，此方案实验周期在半个月以上的动物实验酌情使用。
以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL玉米油中，混合均匀。
＜1mg/ml表示微溶或不溶。
普西唐提供的所有化合物浓度为内部测试所得，实际溶液度可能与公布值有所偏差，属于正常的批间细微差异现象。
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；⼀旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
靶点：
MEK1;19 nM (IC50)
MEK2;47 nM (IC50)
MEK2;47 nM (IC50)
体外研究：
Refametinib（BAY 869766；RDEA119）选择性地直接结合 MEK1/2 酶中的变构袋。在酶抑制测定中，Refametinib 以非 ATP 竞争性方式有效抑制 MEK 活性（MEK1 IC50=19 nM，MEK2 IC50=47 nM），这是通过将 ATP 中的放射性磷酸盐掺入作为底物的 ERK 来确定的。通过不同组织来源和 BRAF 突变状态的几种人类癌细胞系中 ERK1/2 的磷酸化来测量，Refametinib 有效抑制 MEK 活性，EC50 值范围为 2.5 至 15.8 nM。 Refametinib 可抑制具有功能获得性 V600E BRAF 突变体的人类癌细胞系的锚定依赖性生长，GI50 值范围为 67 至 89 nM。相比之下，Refametinib 对野生型 BRAF 细胞系（A431 细胞）或带有 BRAF 突变 G464V 的 MDA-MB-231 细胞的生长抑制效力显着降低，显示固有激酶活性的增强最小（<2 倍增加）。在不依赖贴壁的条件下，所有测试的细胞系的 GI50 值相似 (40-84 nM)。在不依赖锚定的条件下，MDA-MB-231 和 A431 细胞对瑞法美替尼显着更敏感。
体内研究：
Refametinib (BAY 869766; RDEA119) 是一种口服有效、非 ATP 竞争性、高度选择性的 MEK1/2 抑制剂，在人类肿瘤异种移植模型中具有活性，并且在动物的治疗暴露范围内具有良好的耐受性。
激酶实验：
MEK 激酶实验：使用pET21a 载体，从大肠杆菌中，亲和纯化激酶失活的鼠ERK2(mERK2) K52A/T183A。使用mERK2 K52A T183A作为底物测定MEK1激酶活性。在25 mMHEPES (pH 7.8), 1 mM MgCl2, 50 mM NaCl, 0.2 mM EDTA, 和 50 μM ATP 存在时，重组MEK1酶 (5 nM) 首先被0.02单位或 1.5 nM RAF1，在25oC下激活30分钟。加入2 μM mERK2 K52A T183A 和 2.5 μCi [γ-33P] ATP，开始反应，总体积为20 μL。测定MEK2 激酶活性方法相似，除了不需要激活RAF1，在实验中使用 11 nM MEK2 酶(活性的)。通过 Invitrogen使用SelectScreen激酶谱型分析激酶谱。进行Z’-LYTE 生化实验。 RDEA119按10 μM作用于205种激酶重复进行实验4次。
细胞实验：
细胞系：A375, SK-MEI-28, Colo205, HT-29 和BxPC3 细胞系
浓度：10-1000 nM
处理时间：48 小时
方法：为了进行贴壁依赖性生长抑制实验，细胞按每孔1,000/20 AL/接种在白色 384孔板上，或者按每孔4,000/100 μL接种在白色96孔板上。在37oC, 5% CO2，100%湿度环境下温育24小时后, RDEA119在37oC 下温育48小时，然后使用CellTiter-Glo检测。为了测定 96孔贴壁非依赖性生长实验，使用完全RPMI 1640培养基中的60 μL 0.15%琼脂糖溶液填满“不易结合”板的孔中。然后每孔加入60 μL 含9,000 个溶于0.15% 琼脂糖的细胞的完全RPMI 1640培养基。24 小时后，加入 60 μL 3 ×溶于无琼脂糖完全培养基的药物溶液。7天后，每孔加入 36 μL 6 × MTS，内盐试剂。在37oC处理2小时，然后使用M5 酶标仪在490 nm 处测定吸光值。
浓度：10-1000 nM
处理时间：48 小时
方法：为了进行贴壁依赖性生长抑制实验，细胞按每孔1,000/20 AL/接种在白色 384孔板上，或者按每孔4,000/100 μL接种在白色96孔板上。在37oC, 5% CO2，100%湿度环境下温育24小时后, RDEA119在37oC 下温育48小时，然后使用CellTiter-Glo检测。为了测定 96孔贴壁非依赖性生长实验，使用完全RPMI 1640培养基中的60 μL 0.15%琼脂糖溶液填满“不易结合”板的孔中。然后每孔加入60 μL 含9,000 个溶于0.15% 琼脂糖的细胞的完全RPMI 1640培养基。24 小时后，加入 60 μL 3 ×溶于无琼脂糖完全培养基的药物溶液。7天后，每孔加入 36 μL 6 × MTS，内盐试剂。在37oC处理2小时，然后使用M5 酶标仪在490 nm 处测定吸光值。
动物实验：
动物模型：皮下注射A375, HT-29和 A431肿瘤的雌性无胸腺裸鼠;携带 Colo205肿瘤的雄性无胸腺裸鼠
剂量：25或50 mg/kg
给药处理：口服处理，每天一次，持续14天
剂量：25或50 mg/kg
给药处理：口服处理，每天一次，持续14天
保存条件：
-20°C
注意事项：
1、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2、以上信息仅做参考交流之用。
2、以上信息仅做参考交流之用。
UN码：
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危害声明：
安全说明：
搜索质检报告(COA)
参考文献 & 客户发表文献
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
