产品简介：
AIDzol是传统Trizol 的免氯仿升级版，广泛适用于从各类动物组织、植物材料、培养细胞、细菌等样品中提取Total RNA。与传统 Trizol 提取方法相比，本产品不需要使用氯仿进行分层，操作更简单，且全程可在常温进行，同时AIDzol去除DNA能力比传统Trizol强大，得到的RNA无DNA污染，不需要DNA酶消化就可以直接用于下游实验。 本产品配套了离心柱技术， 经过多次漂洗去除各种杂质，简化了实验操作，并最大限度得到最纯净的RNA。
操作步骤：
第一次用前请先在漂洗液RW瓶和去蛋白液PE瓶中加入指定量无水乙醇。
一：样本处理
1：植物组织：取新鲜植物组织在液氮中充分研磨或将植物组织剪碎后直接在 AIDzol 中迅速研磨，每25 - 50 mg组织加入0.5 ml AIDzol，混匀。
2：动物组织：取新鲜或-70℃冻存动物组织尽量剪碎，每15 - 50 mg组织加入0.5 ml AIDzol，匀浆仪进行匀浆处理。或在液氮中研磨后加入0.5 ml AIDzol 混匀。
3：c.单层培养细胞：尽量去除干净残留培养液后直接往直径3.5 cm 的培养板中加入0.5 ml AIDzol 覆盖并反复吹打裂解细胞。依据培养板的面积而不是依据细胞的数量来决定所需的AIDzol 量（每10 cm2加0.5 ml）。当AIDzol 量不足时可导致抽提的RNA中污染有 DNA。
注意：贴壁培养细胞往往不能完全从培养瓶（皿）脱落，这并不意味着裂解不完全，此时细胞膜实际已经完全破裂开，并已释放出全部RNA，继续做即可。
4：细胞悬液： 离心收集细胞。 在 AIDzol 试剂中用移液管反复吹打来裂解细胞。每1 - 5×106 的动物细胞，植物细胞或每5×106细菌加0.5 ml AIDzol。在加入AIDzol 前应避免洗涤细胞，因为那样会增加mRNA降解的可能性。破裂某些细菌可能需要使用匀浆器。
5：液体样本：每200 μl（低于200 μl时，可用普通去离子水或者纯水补足）血浆、血清等液体样本，加入0.5ml AIDzol 后振荡混匀 。
二：向上述裂解液中加入2/5体积的去离子水或者纯水（普通实验室用水即可，不需要RNase-free ，每500 μl AIDzol加200 μl 水)，剧烈振荡混匀，室温静置5 min。当处理样本量较大50 mg 左右时，可延长室温静置时间到10 - 15 min。
三：室温12,000 rpm离心15 min。
四：离心后溶液分成上层水相(含RNA)和下层沉淀(含蛋白质、DNA、多糖等杂质)，小心吸取上层水相至一个新的离心管中。
上层水相约占总体积的90%，如用500 μl AIDzol 进行提取，上层水相约为630 μl，建议吸取500 μl；提取微量样本时，为减少RNA损失，可以全部转移上清。
当样本量较小时，离心后可能不会出现下层沉淀，属于正常现象，可继续按后续步骤完成提取。
五：5.加入水相体积一半也就是0.5倍体积的无水乙醇，混匀（此时可能会出现沉淀）。得到的溶液和可能沉淀转入吸附柱RA中（吸附柱套在收集管内， 12,000rpm 离心30 sec，弃废液，将吸附柱重新套回收集管。
吸附柱容积为750 μl，若混合液超过该体积请分多次进行上柱。 请弃废液后将吸附柱放回收集管，继续转入剩余混合物到吸附柱RA中离心。
六：6.加500 μl去蛋白液PE（请先检查是否已加入无水乙醇!），12,000 rpm离心30 sec，弃废液。
七：加入500 μl漂洗液RW（请先检查是否已加入无水乙醇!），12,000 rpm 离心30 sec，弃废液。
八：重复步骤七一次。
九：将吸附柱RA放回空收集管中，12,000 rpm离心2 min，尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
十：将吸附RA转移至新的1.5 ml离心管中，向吸附柱膜中央悬空滴加40 - 60 μl的RNase-free ddH2O，静置1 min，12,000 rpm离心1 min。
洗脱体积建议不少于30 μl，体积过小会影响核酸回收效率。
以下步骤都可以帮助提高RNA产物浓度：
RNase-free ddH2O于90℃预热；
将第一次洗脱液重新加入吸附柱进行洗脱。
一：样本处理
1：植物组织：取新鲜植物组织在液氮中充分研磨或将植物组织剪碎后直接在 AIDzol 中迅速研磨，每25 - 50 mg组织加入0.5 ml AIDzol，混匀。
2：动物组织：取新鲜或-70℃冻存动物组织尽量剪碎，每15 - 50 mg组织加入0.5 ml AIDzol，匀浆仪进行匀浆处理。或在液氮中研磨后加入0.5 ml AIDzol 混匀。
3：c.单层培养细胞：尽量去除干净残留培养液后直接往直径3.5 cm 的培养板中加入0.5 ml AIDzol 覆盖并反复吹打裂解细胞。依据培养板的面积而不是依据细胞的数量来决定所需的AIDzol 量（每10 cm2加0.5 ml）。当AIDzol 量不足时可导致抽提的RNA中污染有 DNA。
4：细胞悬液： 离心收集细胞。 在 AIDzol 试剂中用移液管反复吹打来裂解细胞。每1 - 5×106 的动物细胞，植物细胞或每5×106细菌加0.5 ml AIDzol。在加入AIDzol 前应避免洗涤细胞，因为那样会增加mRNA降解的可能性。破裂某些细菌可能需要使用匀浆器。
5：液体样本：每200 μl（低于200 μl时，可用普通去离子水或者纯水补足）血浆、血清等液体样本，加入0.5ml AIDzol 后振荡混匀 。
二：向上述裂解液中加入2/5体积的去离子水或者纯水（普通实验室用水即可，不需要RNase-free ，每500 μl AIDzol加200 μl 水)，剧烈振荡混匀，室温静置5 min。当处理样本量较大50 mg 左右时，可延长室温静置时间到10 - 15 min。
三：室温12,000 rpm离心15 min。
四：离心后溶液分成上层水相(含RNA)和下层沉淀(含蛋白质、DNA、多糖等杂质)，小心吸取上层水相至一个新的离心管中。
上层水相约占总体积的90%，如用500 μl AIDzol 进行提取，上层水相约为630 μl，建议吸取500 μl；提取微量样本时，为减少RNA损失，可以全部转移上清。
当样本量较小时，离心后可能不会出现下层沉淀，属于正常现象，可继续按后续步骤完成提取。
五：5.加入水相体积一半也就是0.5倍体积的无水乙醇，混匀（此时可能会出现沉淀）。得到的溶液和可能沉淀转入吸附柱RA中（吸附柱套在收集管内， 12,000rpm 离心30 sec，弃废液，将吸附柱重新套回收集管。
吸附柱容积为750 μl，若混合液超过该体积请分多次进行上柱。 请弃废液后将吸附柱放回收集管，继续转入剩余混合物到吸附柱RA中离心。
六：6.加500 μl去蛋白液PE（请先检查是否已加入无水乙醇!），12,000 rpm离心30 sec，弃废液。
七：加入500 μl漂洗液RW（请先检查是否已加入无水乙醇!），12,000 rpm 离心30 sec，弃废液。
八：重复步骤七一次。
九：将吸附柱RA放回空收集管中，12,000 rpm离心2 min，尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
十：将吸附RA转移至新的1.5 ml离心管中，向吸附柱膜中央悬空滴加40 - 60 μl的RNase-free ddH2O，静置1 min，12,000 rpm离心1 min。
洗脱体积建议不少于30 μl，体积过小会影响核酸回收效率。
以下步骤都可以帮助提高RNA产物浓度：
RNase-free ddH2O于90℃预热；
将第一次洗脱液重新加入吸附柱进行洗脱。
产品特点：
1：离心吸附柱内硅基质膜全部采用特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。
2：结合了异硫氰酸胍/酚一步法试剂稳定性好，纯度高和离心柱方便快捷的优点，不需要异丙醇沉淀和乙醇洗涤过程，RNA可以直接从离心柱上洗脱避免了过度干燥不易溶解问题。
3：优良的AIDzol Reagent配方，可以有效的消除基因组DNA残留。
4：多次漂洗去蛋白过程，提取RNA纯度更高。
5：有效的去除了5S在总RNA中含量，提高了纯度。
2：结合了异硫氰酸胍/酚一步法试剂稳定性好，纯度高和离心柱方便快捷的优点，不需要异丙醇沉淀和乙醇洗涤过程，RNA可以直接从离心柱上洗脱避免了过度干燥不易溶解问题。
3：优良的AIDzol Reagent配方，可以有效的消除基因组DNA残留。
4：多次漂洗去蛋白过程，提取RNA纯度更高。
5：有效的去除了5S在总RNA中含量，提高了纯度。
组分：
| 组分 | 规格(50T) | 规格(100T) | 储存 |
| AIDzol Reagent | 25mL | 50mL | 4℃避光 |
| 去蛋白液PE (第一次使用前按标签说明加指定量乙醇) |
16mL | 32mL | 室温 |
| 漂洗液RW (第一次使用前按标签说明加指定量乙醇) |
10mL | 25mL | 室温 |
| RNase-free H2O | 5 ml | 10 ml | 室温 |
| RNase-free吸附柱RA | 50个 | 100个 | 室温 |
| 收集管（2ml） | 50个 | 100个 | 室温 |
保存条件：
室温 12个月
注意事项：
一：储存注意事项
1：因此运输和储存均在室温下（15℃-25℃）进行。AIDzol Reagent可以常温运输，收到后4℃避光可长期保存，常温保存3个月也不影响使用质量。
2：避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
二：使用注意事项
1：第一次使用前请先在漂洗液RW瓶和去蛋白液PE瓶中加入指定量乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
2：本试剂盒抑制RNA酶效果极佳，所有离心步骤如未加说明，均可在常温进行。
3：AIDzol Reagent和去蛋白液PE中含有刺激性有害化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4：常规的琼脂糖凝胶电泳和变性胶电泳均可以用来分析RNA的质量。好的RNA产物在电泳后应该可以看到明显的二条优势核糖体RNA带，分别为~2Kb（28S），~1Kb（18S），条带亮度比值约为2：1。有时候也可以看到~0.1kb和0.3Kb(5S，tRNA)带。但有时候根据不同的物种如某些植物组织可以看到4，5条带也属于正常现象，如果RNA未成熟的前体或者不均一核RNA、小核RNA提取出来也可能看到介于7Kb和15Kb之间的不连续的高分子量条带。
5：加入AIDzol Reagent匀浆后，加水离心前样品可在 -60℃至-70℃ 保存一个月以上。
1：因此运输和储存均在室温下（15℃-25℃）进行。AIDzol Reagent可以常温运输，收到后4℃避光可长期保存，常温保存3个月也不影响使用质量。
2：避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
二：使用注意事项
1：第一次使用前请先在漂洗液RW瓶和去蛋白液PE瓶中加入指定量乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
2：本试剂盒抑制RNA酶效果极佳，所有离心步骤如未加说明，均可在常温进行。
3：AIDzol Reagent和去蛋白液PE中含有刺激性有害化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4：常规的琼脂糖凝胶电泳和变性胶电泳均可以用来分析RNA的质量。好的RNA产物在电泳后应该可以看到明显的二条优势核糖体RNA带，分别为~2Kb（28S），~1Kb（18S），条带亮度比值约为2：1。有时候也可以看到~0.1kb和0.3Kb(5S，tRNA)带。但有时候根据不同的物种如某些植物组织可以看到4，5条带也属于正常现象，如果RNA未成熟的前体或者不均一核RNA、小核RNA提取出来也可能看到介于7Kb和15Kb之间的不连续的高分子量条带。
5：加入AIDzol Reagent匀浆后，加水离心前样品可在 -60℃至-70℃ 保存一个月以上。
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危害声明：
安全说明：
搜索质检报告(COA)
参考文献 & 客户发表文献
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
