( 母液浓度为 40 mg/mL ), 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度,请先与我们客服联系。| 中文名称: | 土壤基因组DNA提取试剂盒 一键复制产品信息 | ||||
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本产品采用独特的方法去除高腐殖酸含量,适用于堆肥、沉积物和粪便等难处理土壤类型。提取的DNA具有高纯度,可实现对样本中生物体更成功的PCR扩增。PCR分析已成功检测多种微生物,包括细菌(如枯草芽孢杆菌、炭疽杆菌)、真菌(如酵母菌、霉菌)、藻类以及放线菌(如链霉菌属)等。
向样本添加磷酸钠缓冲液和MT缓冲液后,研磨管中的填充体积应保留足够空间,以确保FastPrep仪器高效处理。建议使用500 mg起始样本,同时管中需保留250-500μl空隙。过度填充研磨管可能导致样本损失或试管破裂。研磨管盖必须紧固但避免过紧,以防样本泄漏。若单管无法容纳样本量,建议分装至多管处理。该试剂盒已在FastPrep仪器中经过严格测试:在速度设置为6.0的条件下运行40秒即可裂解几乎所有样本。若用户经实验确定需延长处理时间,应在连续两次FastPrep 匀浆处理之间将含样本的研磨管置于冰上孵育至少2分钟,防止样本和试管过热。若使用其他类型的珠磨设备,请遵循制造商的操作手册设置适当参数以确保性能。
1:向研磨管中加入最多不超过500 mg土壤样本。
2:向土壤样本中加入980 μL Sodium Phosphate Buffer、120 μL MT Buffer。用前检查 MT Buffer。如果天气冷导致MT Buffer 出现沉淀,可以60°C加热重新溶解,轻柔颠倒混匀后使用。
3:使用FastPrep样品制备仪,6.0 m/s,研磨40 sec,或涡旋震荡10 min。本研磨条件适合于大多数样本,但个别样本需要的研磨速度和时间需要尝试后再确定。如果没有FastPrep仪器,可使用涡旋震荡仪(推荐搭配相应适配器),以最大速度涡旋10 min来裂解样本。
4:13, 000 rpm离心5-10 min沉淀杂质。
5:小心地将上清液(约800μL)转移至新的2 mL离心管(自备)。加入300μL SR Solution,涡旋10 sec充分混匀,13, 000 rpm 离心 1 min。 转移上清液到2 mL离心管(注意不要吸到底部可能的沉淀)。
6:柱平衡:向吸附柱AC中加入100 µL Banlance Solution,13,000 rpm 离心1 min,弃滤液,备用。平衡液可以增强硅胶膜的吸附核酸能力,请使用当天处理的吸附柱。
7:加入等体积的 GH Solution 到上清液中,涡旋震荡或者吹打混匀。使用前确保GH Solution瓶子中已经加入了指定量异丙醇。确保GH Solution 直接加入上清液并立刻混匀。
8:将上一步混合物720μL(包括可能有的沉淀)加入一个吸附柱AC中,(吸附柱放入收集管中),13, 000 rpm 离心30 sec,倒掉收集管中的废液。将离心柱放回收集管,重复直到所有的混合物都加完。大约需要重复3次才能将所有的混合物都上到离心柱上。
9:加入600μL Buffer WB(请先检查是否已加入无水乙醇!),13, 000 rpm 离心30 sec,弃掉废液。再加入 600 μL Buffer WB重复漂洗一遍。
10:将吸附柱AC放回空收集管中,13, 000 rpm离心空甩2 min,尽量除去漂洗液,以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
11:取出吸附柱AC,放入一个干净的1.5 mL离心管中,在吸附膜的中间部位加50-80 μL Elution Buffer(洗脱缓冲液事先在 80-90°C水浴中预热效果更好),室温放置3-5 min,13, 000 rpm 离心1 min。洗脱体积越大,洗脱效率越高,如需要DNA浓度较高,可以适当减少洗脱体积,但是最小体积不应少于30 μL,体积过小降低洗脱效率,减少DNA产量。将得到的洗脱液重新加入离心吸附柱中,室温放置2 min,13, 000 rpm离心1 min。重复洗脱一次可以提高浓度约10-15%。
12:洗脱下来的DNA可以立刻使用,或者可以放置在-20°C保存。
| 组分 | 组分名称 | 规格(50T) | 储存 |
| 组分1 | Bead Tube | 50 | RT |
| 组分2 | Balance Solution | 5 mL | RT |
| 组分3 | Sodium Phosphate Buffer | 50mL | RT |
| 组分4 | MT Buffer | 6mL | RT |
| 组分5 | SR Solution | 15mL | RT |
| 组分6 | GH Solution | 15mL(首次使用前加入45mL异丙醇) | RT |
| 组分7 | Buffer WB | 13 mL(首次使用前加入52mL乙醇) | RT |
| 组分8 | Elution Buffer | 10 mL | RT |
| 组分9 | DNA Bind Columns | 50 | RT |
分析证书(COA)
Lot/Batch Number
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
母液,添加 300 μLPEG300
混匀澄清,再加 50μLTween80, 混匀澄清,再加 600μLSaline/PBS/ddH2O
混匀澄清方案所需的各种助溶剂如: DMSO , PEG300 / PEG400 , Tween 80 , SBE-β-CD , 玉米油 等, 均可点击跳转或在网站搜索购买。
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
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