产品简介：
本产品采用特制的裂解液，可以选择性的裂解细胞膜，释放细胞浆RNA，离心取上清便可以提取细胞浆RNA。去除上清以后的留下的细胞核沉淀可以提取细胞核RNA，从而达到分别提取细胞浆RNA和细胞核RNA的目的。适用于快速提取新鲜培养组织细胞的细胞浆/细胞核RNA。
操作步骤：
第一次使用前请先在漂洗液RW瓶加入指定量无水乙醇
可选：每次临用前在BufferRLN中加入1mMDTT(optional)
可选：每次临用前在BufferRLN中加入1000U/mlRNaseinhibitor
一：样品处理裂解
1：培养细胞
A1：贴壁细胞：培养皿生长的细胞（3.5cm直径不需胰酶消化，彻底吸干净培养液体后加1xPBS漂洗一遍，彻底吸掉液体，接操作步骤3；不方便直接裂解的培养容器，可以用细胞刮子刮下细胞，或者胰蛋白酶消化后吹打下来收集细胞到1.5ml离心管。
A2：悬浮细胞：收集<107悬浮细胞到一个1.5ml离心管。
B：300xg离心5分钟。完全吸弃上清，留下细胞团，注意不完全弃上清会稀释 裂解液导致产量纯度降低。
C：快速拨弹（flick）离心管底部，使细胞沉淀松散，立刻接操作步骤3。
2：小量组织
A：液氮研磨匀浆：
可以直接切10-15mg组织放入研钵，加入液氮磨成粉，然后趁液氮挥发完，但尚未解冻时候加入175μlBufferRLN事先放冰上预冷))，用移液器吹打直到组织裂解完全，转移裂解物到新的离心管。
B：立刻接操作步骤4。
3：加入175μlBufferRLN事先放冰上预冷裂解细胞。
如果是培养皿，加入BufferRLN后摇晃将BufferRLN覆盖所有的细胞，置冰上裂解5分钟，中间可摇晃一两次帮助裂解。移液器吹打帮助裂解后转入新离心管。如果是收集的细胞沉淀，flick管底打散沉淀后加BufferRLN充分重悬细胞，置冰上裂解5分钟，中间可颠倒一两次帮助裂解。
4：13,000rpm离心3分钟。转移上清（含细胞浆RNA）到一个新离心管。保留沉淀（含细胞核RNA）。在沉淀中加入400μl裂解液RLTPlus，振荡混匀置冰上备用。
根据细胞的种类和多少，有时候可能看不见明显的细胞核沉淀。
二：细胞浆RNA提取
1：样品处理裂解第4步得到的上清中加入600μl裂解液RLTPlus，涡旋震荡混匀。加入430μl无水乙醇，吹打混匀。
2：立刻将混合物每次小于720μl多可以分两次加入加入一个吸附柱RA中，（吸附柱放入收集管中）13,000rpm离心30秒，弃掉废液。
3：加700μl去蛋白液RW1，室温放置30秒，13,000rpm离心30秒，弃掉废液。
4：加入500μl漂洗液RW（请先检查是否已加入无水乙醇13,000rpm离心30秒，弃掉废液。加入500μl漂洗液RW重复一遍。
5：将吸附柱RA放回空收集管中，13,000rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
6：取出吸附柱RA，放入一个干净1.5ml离心管中，根据预期RNA产量在吸附膜的中间部位加3050μlRNasefreewater室温放置1分钟，1,3000rpm离心1分钟得到RNA溶液。
洗脱缓冲液体积不应少于30μl，体积过小影响回收效率。如果需要得到更大浓度的RNA将离心得到的RNA溶液加回到吸附柱重复洗脱一遍。
三：细胞核RNA提取
1：（三）、样品处理裂解第4步得到的重悬后沉淀（已经加入了400μl裂解液RLTPlus）吹 打混匀后加入一个RNA吸附柱RA上（吸附柱放入收集管中）。立刻13,000rpm离心1分钟保留滤过液（细胞核RNA在滤过液中）。
2：在滤过液中加入一半体积（0.5倍体积）乙醇,此时可能出现沉淀但是不影响提取过程立即吹打混匀不要离心。
3：立刻将混合物加入一个新的吸附柱RA中，（吸附柱放入收集管中）13,000rpm离心30秒，弃掉废液。
4：接操作步骤“（二）细胞浆RNA提取”步骤3开始做，完成后续的实验操作。
可选：每次临用前在BufferRLN中加入1mMDTT(optional)
可选：每次临用前在BufferRLN中加入1000U/mlRNaseinhibitor
一：样品处理裂解
1：培养细胞
A1：贴壁细胞：培养皿生长的细胞（3.5cm直径不需胰酶消化，彻底吸干净培养液体后加1xPBS漂洗一遍，彻底吸掉液体，接操作步骤3；不方便直接裂解的培养容器，可以用细胞刮子刮下细胞，或者胰蛋白酶消化后吹打下来收集细胞到1.5ml离心管。
A2：悬浮细胞：收集<107悬浮细胞到一个1.5ml离心管。
B：300xg离心5分钟。完全吸弃上清，留下细胞团，注意不完全弃上清会稀释 裂解液导致产量纯度降低。
C：快速拨弹（flick）离心管底部，使细胞沉淀松散，立刻接操作步骤3。
2：小量组织
A：液氮研磨匀浆：
可以直接切10-15mg组织放入研钵，加入液氮磨成粉，然后趁液氮挥发完，但尚未解冻时候加入175μlBufferRLN事先放冰上预冷))，用移液器吹打直到组织裂解完全，转移裂解物到新的离心管。
B：立刻接操作步骤4。
3：加入175μlBufferRLN事先放冰上预冷裂解细胞。
如果是培养皿，加入BufferRLN后摇晃将BufferRLN覆盖所有的细胞，置冰上裂解5分钟，中间可摇晃一两次帮助裂解。移液器吹打帮助裂解后转入新离心管。如果是收集的细胞沉淀，flick管底打散沉淀后加BufferRLN充分重悬细胞，置冰上裂解5分钟，中间可颠倒一两次帮助裂解。
4：13,000rpm离心3分钟。转移上清（含细胞浆RNA）到一个新离心管。保留沉淀（含细胞核RNA）。在沉淀中加入400μl裂解液RLTPlus，振荡混匀置冰上备用。
根据细胞的种类和多少，有时候可能看不见明显的细胞核沉淀。
二：细胞浆RNA提取
1：样品处理裂解第4步得到的上清中加入600μl裂解液RLTPlus，涡旋震荡混匀。加入430μl无水乙醇，吹打混匀。
2：立刻将混合物每次小于720μl多可以分两次加入加入一个吸附柱RA中，（吸附柱放入收集管中）13,000rpm离心30秒，弃掉废液。
3：加700μl去蛋白液RW1，室温放置30秒，13,000rpm离心30秒，弃掉废液。
4：加入500μl漂洗液RW（请先检查是否已加入无水乙醇13,000rpm离心30秒，弃掉废液。加入500μl漂洗液RW重复一遍。
5：将吸附柱RA放回空收集管中，13,000rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
6：取出吸附柱RA，放入一个干净1.5ml离心管中，根据预期RNA产量在吸附膜的中间部位加3050μlRNasefreewater室温放置1分钟，1,3000rpm离心1分钟得到RNA溶液。
洗脱缓冲液体积不应少于30μl，体积过小影响回收效率。如果需要得到更大浓度的RNA将离心得到的RNA溶液加回到吸附柱重复洗脱一遍。
三：细胞核RNA提取
1：（三）、样品处理裂解第4步得到的重悬后沉淀（已经加入了400μl裂解液RLTPlus）吹 打混匀后加入一个RNA吸附柱RA上（吸附柱放入收集管中）。立刻13,000rpm离心1分钟保留滤过液（细胞核RNA在滤过液中）。
2：在滤过液中加入一半体积（0.5倍体积）乙醇,此时可能出现沉淀但是不影响提取过程立即吹打混匀不要离心。
3：立刻将混合物加入一个新的吸附柱RA中，（吸附柱放入收集管中）13,000rpm离心30秒，弃掉废液。
4：接操作步骤“（二）细胞浆RNA提取”步骤3开始做，完成后续的实验操作。
产品特点：
1：完全不使用有毒的苯酚，氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
2：简捷，单个样品操作一般可在25分钟内完成。
3：独家研发成功基因组DNA清除柱技术 特殊配方可以有效清除gDNA 残留。和进口的同类对比，大大减少了细胞核RNA里面的gDNA残留量。
4：多次柱漂洗确保高纯度OD 260 /OD 280典型的比值高达2 1 2. 2 基本无 DNA残留可用于RT PCR Northern blot 和各种实验。
2：简捷，单个样品操作一般可在25分钟内完成。
3：独家研发成功基因组DNA清除柱技术 特殊配方可以有效清除gDNA 残留。和进口的同类对比，大大减少了细胞核RNA里面的gDNA残留量。
4：多次柱漂洗确保高纯度OD 260 /OD 280典型的比值高达2 1 2. 2 基本无 DNA残留可用于RT PCR Northern blot 和各种实验。
组分：
| 组分名称 | 规格(50T) | 储存 |
| Buffer RLN | 20mL | RT |
| 裂解液RLT Plus | 50mL | RT |
| 去蛋白液RW1 | 70mL | RT |
| 漂洗液RW | 20mL,第一次使用前按说明加指定量乙醇 | RT |
| RNase free H 2 O | 10mL | RT |
| RNase free吸附柱RA和收集管 | 100EA | RT |
保存条件：
室温
注意事项：
1：需要使用新鲜的细胞，组织样品。
2：所有的离心步骤均可在室温完成4离心也可以）使用转速可以达到13,000rpm
3：需要自备乙醇，研钵可选。
4：裂解液RLTPlus和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5：本试剂盒可以提取100个细胞浆RNA样品，或者50个细胞核样品。因为提取一个细胞核RNA样品需要2套RNA吸附柱，因此如果需要同时提取50个细胞浆RNA样品+50个细胞核RNA样品，需要额外单独订购50套RNA吸附柱。
2：所有的离心步骤均可在室温完成4离心也可以）使用转速可以达到13,000rpm
3：需要自备乙醇，研钵可选。
4：裂解液RLTPlus和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5：本试剂盒可以提取100个细胞浆RNA样品，或者50个细胞核样品。因为提取一个细胞核RNA样品需要2套RNA吸附柱，因此如果需要同时提取50个细胞浆RNA样品+50个细胞核RNA样品，需要额外单独订购50套RNA吸附柱。
UN码：
HazardClass：
危害声明：
安全说明：
搜索质检报告(COA)
参考文献 & 客户发表文献
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
