产品简介:
本产品包含A9LongHiFiDNAPolymerase、dNTPs和优化的反应缓冲液,浓度为2×。使用时只需加入模板、引物,并补足水至Mix终浓度为1×即可。A9为多种采用最先进基因工程改造而来的超保真酶添加延伸因子混合而成极大的提高了扩增长度、扩增速度、保真性和产量。A9Mix是长片段超保真快速扩增的首选产品。本制品含红色示踪染料,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。
操作步骤:
建议PCR 体系设置: | |||
Component | 25 μl Reaction | 50 μl Reaction | Final Concentration |
2× A9 PCR MasterMix | 12.5 μl | 25.0 μl | 1× |
Forward Primer(10 μM) | 0.5 μl | 1 μl | 0.2 μM |
Reverse Primer(10 μM) | 0.5 μl | 1 μl | 0.2 μM |
Template DNA | as required | as required | |
ddH2O | up to 25 μl | up to 50 μl | |
参考模板用量(50 μl 反应体系):质粒:0.1-10ng;细菌基因组:10-100ng;人类基因组:50-150ng;cDNA:1-5μl from RT reaction。 |
建议PCR 循环条件: | |||
Step | Temprature | Time | Cycle Number |
Initial denaturation | 95℃ | 3 minutes | |
Denaturation | 95℃ | 10 seconds | 30 cycles |
Annealing | 55℃ | 10-15 seconds | |
Extension | 72℃ | 15-20 seconds / kb | |
Final Extension | 72℃ | 2-5 minutes | |
4-8℃ | Hold |
产品特点:
1:扩增速度快:延伸速度可以达到34kb/min,是pfu的68倍。
2:扩增产量高一般PCR产物量比传统pfu产量高50%-100%。
3:优异保真性:保真度是taq的54倍以上。一般随机挑一个菌测序便是正确无突变菌落。
4:扩增长度长:以复杂基因组DNA为模板适合扩增不超过10kb左右的产物,以简单基因组、质粒和噬菌体DNA为模板适合扩增不超过15kb左右的产物。
2:扩增产量高一般PCR产物量比传统pfu产量高50%-100%。
3:优异保真性:保真度是taq的54倍以上。一般随机挑一个菌测序便是正确无突变菌落。
4:扩增长度长:以复杂基因组DNA为模板适合扩增不超过10kb左右的产物,以简单基因组、质粒和噬菌体DNA为模板适合扩增不超过15kb左右的产物。
保存条件:
-20℃ 两年
UN码:
HazardClass:
危害声明:
安全说明:
搜索质检报告(COA)
参考文献 & 客户发表文献
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )