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（ 母液浓度为 40 mg/mL ）, 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度，请先与我们客服联系。| 中文名称: | A8 FastHiFi PCR MasterMix 一键复制产品信息 | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| 英文名称: | A8 FastHiFi PCR MasterMix | ||||
| 别名: | 常规高保真，建议3kb内长度 | ||||
| CAS No: | |||||
| CAS No: | |||||
产品简介：
本产品包含A8FastHiFiDNAPolymerase、dNTPs和优化的反应缓冲液，浓度为2×。使用时只需加入模板、引物，并补足水至Mix终浓度为1×即可。A8来自于基因工程改造的pfu大大提高了扩增速度、保真性和产量。A8Mix是非长片段超保真快速扩增的首选产品。本制品含红色示踪染料，不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳；也可经过纯化处理，以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。
操作步骤：
| 建议PCR 体系设置： | |||
| Component | 25 μl Reaction | 50 μl Reaction | Final Concentration |
| 2× F8 PCR MasterMix | 12.5 μl | 25.0 μl | 1× |
| Forward Primer(10 μM) | 0.5 μl | 1μl | 0.2 μM |
| Reverse Primer(10 μM) | 0.5 μl | 1 μl | 0.2 μM |
| Template DNA | as required | as required | |
| ddH2O | up to 25 μl | up to 25 μl | |
| 参考模板用量（50 μl 反应体系）： 质粒：0.1-10ng；细菌基因组：10-100ng；人类基因组：50-150ng；cDNA：1-5μl from RT reaction。 | |||
| 建议PCR 循环条件： | |||
| Step | Temprature | Time | Cycle Number |
| Initial denaturation | 94℃ | 3 minutes | |
| Denaturation | 95℃ | 10 seconds | 30 cycles |
| Annealing | 55℃ | 10-15 seconds | |
| Extension | 72℃ | 10 seconds / kb | |
| Final Extension | 72℃ | 2-5 minutes | |
| 4-8℃ | Hold | ||
产品特点：
1：扩增速度快：延伸速度可以达到24kb/min，是pfu的4-8倍。
2：扩增产量高：一般PCR产物量比传统pfu产量高50%-100%。
3：优异保真性：保真度是taq的54倍以上。一般随机挑一个菌测序便是正确无突变菌落。
4：扩增长度指标和pfu一致，可以完全替代pfu进行快速高保真扩增，但不建议用于pfu无法扩增的长片段。以复杂基因组DNA为模板适合扩增不超过3kb左右的产物，以简单基因组、质粒和噬菌体DNA为模板适合扩增不超过6kb左右的产物。
2：扩增产量高：一般PCR产物量比传统pfu产量高50%-100%。
3：优异保真性：保真度是taq的54倍以上。一般随机挑一个菌测序便是正确无突变菌落。
4：扩增长度指标和pfu一致，可以完全替代pfu进行快速高保真扩增，但不建议用于pfu无法扩增的长片段。以复杂基因组DNA为模板适合扩增不超过3kb左右的产物，以简单基因组、质粒和噬菌体DNA为模板适合扩增不超过6kb左右的产物。
保存条件：
-20℃ 两年
注意事项：
1：A8扩增速度快，质粒和简单基因组等简单模板可以采用1520秒/kb；复杂模板如人类基因组可以采用30-45秒/kb。
2：对于GC含量很高的模板，预变性和变性温度可以提高到98℃。A8耐热性强，98℃对A8的活性无改变。
3：如果扩增模板GC含量高或者模板复杂扩增效果不佳时，可在反应混合物中加入DMSO到终浓度1%-8%，按照1%梯度增加摸索最佳浓度。或者加入甜菜碱至终浓度1.0-1.7M。并采用降落PCR（TouchdownPCR）
4：为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2：对于GC含量很高的模板，预变性和变性温度可以提高到98℃。A8耐热性强，98℃对A8的活性无改变。
3：如果扩增模板GC含量高或者模板复杂扩增效果不佳时，可在反应混合物中加入DMSO到终浓度1%-8%，按照1%梯度增加摸索最佳浓度。或者加入甜菜碱至终浓度1.0-1.7M。并采用降落PCR（TouchdownPCR）
4：为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
UN码：
HazardClass：
危害声明：
安全说明：
搜索质检报告(COA)
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
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体内配方的制备方法: 取 50μLDMSO 母液，添加 300 μLPEG300 混匀澄清，再加 50μLTween80, 混匀澄清，再加 600μLSaline/PBS/ddH2O 混匀澄清
方案所需的各种助溶剂如： DMSO ， PEG300 / PEG400 ， Tween 80 ， SBE-β-CD ， 玉米油 等， 均可点击跳转或在网站搜索购买。
母液，添加 300 μLPEG300 混匀澄清，再加 50μLTween80, 混匀澄清，再加 600μLSaline/PBS/ddH2O 混匀澄清方案所需的各种助溶剂如： DMSO ， PEG300 / PEG400 ， Tween 80 ， SBE-β-CD ， 玉米油 等， 均可点击跳转或在网站搜索购买。
以上为“动物实验计算换算器”的使用方法举例，并不是具体某个试剂的配制，请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
剂量转换
对于不同动物的给药剂量换算，您也可以参考 更多
