A8 FastHiFi PCR MasterMix - CAS号查询_生物试剂_化学试剂_分析试剂

中文名称:	A8 FastHiFi PCR MasterMix
英文名称:	A8 FastHiFi PCR MasterMix
别名:	常规高保真，建议3kb内长度
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PS1494 A8 FastHiFi PCR MasterMix 2×,with Red Dye (psaitong)

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产品简介：

本产品包含A8FastHiFiDNAPolymerase、dNTPs和优化的反应缓冲液，浓度为2×。使用时只需加入模板、引物，并补足水至Mix终浓度为1×即可。A8来自于基因工程改造的pfu大大提高了扩增速度、保真性和产量。A8Mix是非长片段超保真快速扩增的首选产品。本制品含红色示踪染料，不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳；也可经过纯化处理，以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。

操作步骤：

建议PCR 体系设置：
Component	25 μl Reaction	50 μl Reaction	Final Concentration
2× F8 PCR MasterMix	12.5 μl	25.0 μl	1×
Forward Primer(10 μM)	0.5 μl	1μl	0.2 μM
Reverse Primer(10 μM)	0.5 μl	1 μl	0.2 μM
Template DNA	as required	as required
ddH2O	up to 25 μl	up to 25 μl
参考模板用量（50 μl 反应体系）：质粒：0.1-10ng；细菌基因组：10-100ng；人类基因组：50-150ng；cDNA：1-5μl from RT reaction。

建议PCR 循环条件：
Step	Temprature	Time	Cycle Number
Initial denaturation	94℃	3 minutes
Denaturation	95℃	10 seconds	30 cycles
Annealing	55℃	10-15 seconds
Extension	72℃	10 seconds / kb
Final Extension	72℃	2-5 minutes
	4-8℃	Hold

产品特点：

1：扩增速度快：延伸速度可以达到24kb/min，是pfu的4-8倍。
2：扩增产量高：一般PCR产物量比传统pfu产量高50%-100%。
3：优异保真性：保真度是taq的54倍以上。一般随机挑一个菌测序便是正确无突变菌落。
4：扩增长度指标和pfu一致，可以完全替代pfu进行快速高保真扩增，但不建议用于pfu无法扩增的长片段。以复杂基因组DNA为模板适合扩增不超过3kb左右的产物，以简单基因组、质粒和噬菌体DNA为模板适合扩增不超过6kb左右的产物。

保存条件：

-20℃ 两年

注意事项：

1：A8扩增速度快，质粒和简单基因组等简单模板可以采用1520秒/kb；复杂模板如人类基因组可以采用30-45秒/kb。
2：对于GC含量很高的模板，预变性和变性温度可以提高到98℃。A8耐热性强，98℃对A8的活性无改变。
3：如果扩增模板GC含量高或者模板复杂扩增效果不佳时，可在反应混合物中加入DMSO到终浓度1%-8%，按照1%梯度增加摸索最佳浓度。或者加入甜菜碱至终浓度1.0-1.7M。并采用降落PCR（TouchdownPCR）
4：为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

UN码：

HazardClass：

危害声明：

安全说明：

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参考文献 & 客户发表文献