中文名称: F8 FastLong PCR MasterMix
英文名称:
CAS No:
PS1489 F8 FastLong PCR MasterMix 2×,with Red Dye (psaitong)
产品简介:
本产品包含F8 FastLong 聚合酶、dNTPs 和优化的反应缓冲液,浓度为2×。使用时只需加入模板、引物,并补足水至Mix 终浓度为1×即可。本制品含红色示踪染料,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。
操作步骤:
建议PCR 体系设置:
Component 25 μl Reaction 50 μl Reaction Final Concentration
2× F8 PCR MasterMix 2.5 μl 25.0 μl
Forward Primer(10 μM) 0.5 μl 1μl 0.2 μM
Reverse Primer(10 μM) 0.5 μl 1μl 0.2 μM
Template DNA as required as required
as required up to 25 μl up to 50 μl
参考模板用量(50 μl 反应体系): 质粒:0.1-10ng;细菌基因组:10-100ng;人类基因组:50-150ng;cDNA:1-5μl from RT reaction。
建议PCR 循环条件:
Step Temprature Time Cycle Number
Initial denaturation 94℃ 2-3 minutes
Denaturation 94℃ 10 seconds 25-35 cycles
Annealing 55℃ 10-15 seconds
Extension 72℃ 10 seconds / kb
Final Extension 72℃ 1-5 minutes
4-8℃ Hold
产品特点:
1:超快的扩增速度:延伸速度可以达到5-10 秒/kb,最短半小时完成PCR。
2:突出的长片段扩增能力:可以扩增高达10 kb 的长片段(包括人类基因组此类的复杂模板)。
3:良好保真性:保真度是taq 的3 倍以上。
4:强大扩增能力:产量高,对于一些有特殊结构的复杂模板和GC 含量高模板有良好效果。
保存条件:
-20℃ 两年
注意事项:
1:F8 扩增速度极快,短片段或者简单模板如质粒模板可以尝试5 秒/kb 延伸速度并采用较少循环数以进一步缩短PCR 时间。长片段(≥3kb)或者复杂模板产量较低可以采用15-20秒/kb 延伸速度或者采用较多循环数。
2:F8 产量较低时可尝试采用较长的延伸时间(如20 秒/kb)和循环数(如35 个)可以提高PCR 产物的产量。
3:对于GC 含量很高的模板,短片段预变性和变性温度可以提高到98℃和/或适当延长变性时间。长片段为了避免DNA 损伤不应该提高变性温度,应该适当延长预变性时间到5分钟,变性时间可以适当提高5-10秒。
4:如果扩增模板GC 含量高或者模板复杂扩增效果不佳时,可在反应混合物中加入DMSO 到终浓度1%-8%,按照1%梯度增加摸索最佳浓度。或者加入甜菜碱至终浓度1.0-1.7 M。并采用降落PCR(Touchdown PCR)。
5:为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
UN码:
HazardClass:
危害声明:
安全说明:
搜索质检报告(COA)
参考文献 & 客户发表文献

本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)

摩尔浓度计算公式

  • =
    *
    *
    *选择对应的单位 *空出希望得到的变量,填写另外两个变量

用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积

稀释公式

稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )

  • * = *

连续稀释计算器方程

  • 连续稀释

  • 初始浓度:
  • 稀释倍数:
  • 计算结果

  • C1=C0/X C1: LOG(C1):
    C2=C1/X C2: LOG(C2):
    C3=C2/X C3: LOG(C3):
    C4=C3/X C4: LOG(C4):
    C5=C4/X C5: LOG(C5):
    C6=C5/X C6: LOG(C6):
    C7=C6/X C7: LOG(C7):
    C8=C7/X C8: LOG(C8):