产品简介:
慢病毒浓缩试剂盒中含有 5×浓缩液,能对所有类型的慢病毒颗粒进行简单快速的浓缩。该试剂盒操作简单,仅需将5×浓缩液与慢病毒上清按比例混合并短时间孵育,然后使用普通的离心机离心,即可得到浓缩的慢病毒颗粒,回收率高达 90%以上,可提高100倍病毒滴度。
操作步骤:
1:收集慢病毒上清液,0.45μm 滤膜过滤,以除去细胞和碎片。
注意:如果使用滤膜过滤,只能使用低蛋白结合力的纤维素醋酸酯或聚醚砜(PES)膜。不能用硝酸纤维素膜(NC)。
2:将慢病毒上清与试剂盒中的浓缩液按照4:1 的比例混合(上清液4份,浓缩液1份),4℃孵育2 hrs或过夜。刚开始时每隔30 min混匀一下,混匀进行3次。
注意:延长孵育时间可以提高回收率。慢病毒颗粒在 4 ℃可以稳定保存数天。
3:于 4℃,4000 g 离心 25 min。
4:小心去除上清,不要晃动管子,一般可见白色沉淀(有时沉淀不可见)。
5:用初始体积(原上清液体积)1/10 - 1/100 的 DMEM 或 PBS 重悬病毒颗粒,小心吹打均匀,重悬沉淀物。
6:测定浓缩慢病毒样品的滴度,50 µL/管分装,于-80 ℃冰箱保存。
注意:慢病毒冻存液避免反复冻融,否则会降低病毒滴度。
注意:如果使用滤膜过滤,只能使用低蛋白结合力的纤维素醋酸酯或聚醚砜(PES)膜。不能用硝酸纤维素膜(NC)。
2:将慢病毒上清与试剂盒中的浓缩液按照4:1 的比例混合(上清液4份,浓缩液1份),4℃孵育2 hrs或过夜。刚开始时每隔30 min混匀一下,混匀进行3次。
注意:延长孵育时间可以提高回收率。慢病毒颗粒在 4 ℃可以稳定保存数天。
3:于 4℃,4000 g 离心 25 min。
4:小心去除上清,不要晃动管子,一般可见白色沉淀(有时沉淀不可见)。
5:用初始体积(原上清液体积)1/10 - 1/100 的 DMEM 或 PBS 重悬病毒颗粒,小心吹打均匀,重悬沉淀物。
6:测定浓缩慢病毒样品的滴度,50 µL/管分装,于-80 ℃冰箱保存。
注意:慢病毒冻存液避免反复冻融,否则会降低病毒滴度。
保存条件:
2-8℃ 6个月
注意事项:
1:为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
UN码:
HazardClass:
危害声明:
安全说明:
搜索质检报告(COA)
参考文献 & 客户发表文献
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )