产品简介：
本制品是采用Super Green（~Sybr Green）嵌合荧光法进行Real Time PCR的专用试剂，为 2× 预混液。已经将DNA聚合酶、dNTP、特殊稳定剂、优化的反应缓冲液、BSA和SYBR Green I等试剂预混成一种适合Real Time PCR反应检测用2×Premix Type试剂, 使用时只需加入模板、引物和水，可减少操作步骤，缩短加样时间，降低污染几率, 具有灵敏度高、特异性强、稳定性好等特点。其核心组分是抗体修饰的热启动 Taq DNA 聚合酶，配合精心优化的Buffer体系，有效抑制非特异性扩增，可对宽广浓度范围的模板进行准确定量，获得稳定可靠的 qPCR 结果，可在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线，对目的基因进行准确定量检测，重复性好，可信度高。
操作步骤：
一：实验优化
若使用默认反应条件反应性能不佳时，则需要进行反应条件的优化，可以从引物浓度以及扩增程序两个方面进行：
1:引物浓度调整：当引物终浓度在0.1-1.0μM范围之间变化时，引物浓度越低, 扩增特异性越高，但扩增效率会有所下降。
2:扩增程序优化：需提高扩增特异性，可使用两步法程序或提高退火温度；需提高扩增效率，可使用三步法程序或延长延伸时间。
二：引物设计原则
1：扩增产物长度建议控制在 80~200 bp；引物长度为 18-25 bp。
2：正向引物和反向引物的 Tm 值相差不超过 1℃为佳，Tm值控制在58-62℃为佳。
3：引物的 GC 含量控制在 40%-60% 之间；引物 3' 端最后一个碱基最好为G或者 C。
4：引物 A、G、C、T 整体分布尽量要均匀，避开 T/C 或者 A/G 的连续结构（特别是 3' 端）。
5：避开引物内部或者两条引物之间的互补序列。
6：使用NCBI BLAST功能检索确认引物的特异性。
三：建议PCR反应体系（见说明书表1，以50μL反应体系为例，反应液配制请在冰上进行）
四：qPCR 反应程序（见说明书表2，可根据机型适当调整）
若使用默认反应条件反应性能不佳时，则需要进行反应条件的优化，可以从引物浓度以及扩增程序两个方面进行：
1:引物浓度调整：当引物终浓度在0.1-1.0μM范围之间变化时，引物浓度越低, 扩增特异性越高，但扩增效率会有所下降。
2:扩增程序优化：需提高扩增特异性，可使用两步法程序或提高退火温度；需提高扩增效率，可使用三步法程序或延长延伸时间。
二：引物设计原则
1：扩增产物长度建议控制在 80~200 bp；引物长度为 18-25 bp。
2：正向引物和反向引物的 Tm 值相差不超过 1℃为佳，Tm值控制在58-62℃为佳。
3：引物的 GC 含量控制在 40%-60% 之间；引物 3' 端最后一个碱基最好为G或者 C。
4：引物 A、G、C、T 整体分布尽量要均匀，避开 T/C 或者 A/G 的连续结构（特别是 3' 端）。
5：避开引物内部或者两条引物之间的互补序列。
6：使用NCBI BLAST功能检索确认引物的特异性。
三：建议PCR反应体系（见说明书表1，以50μL反应体系为例，反应液配制请在冰上进行）
四：qPCR 反应程序（见说明书表2，可根据机型适当调整）
产品描述：
本制品是采用Super Green（~Sybr Green）嵌合荧光法进行Real Time PCR的专用试剂，为 2× 预混液。已经将DNA聚合酶、dNTP、特殊稳定剂、优化的反应缓冲液、BSA和SYBR Green I等试剂预混成一种适合Real Time PCR反应检测用2×Premix Type试剂, 使用时只需加入模板、引物和水，可减少操作步骤，缩短加样时间，降低污染几率, 具有灵敏度高、特异性强、稳定性好等特点。其核心组分是抗体修饰的热启动 Taq DNA 聚合酶，配合精心优化的Buffer体系，有效抑制非特异性扩增，可对宽广浓度范围的模板进行准确定量，获得稳定可靠的 qPCR 结果，可在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线，对目的基因进行准确定量检测，重复性好，可信度高。
保存条件：
-20 ℃
注意事项：
1：本制品不含参比染料ROX，使用时可根据qPCR仪器技术指导决定是否需要加ROX参比染料，用于消除信号本底以及校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。
2：本制品含Super Green I 强光下易分解，降低灵敏度，使用时避免长时间强光照射本制品。
3：建议在冰上配制PCR反应液，再放入PCR仪器中扩增。可以提高扩增特异性，减少背景。
4：使用前上下颠倒轻轻混匀 Mix，请勿涡旋振荡混匀，避免产生过多气泡。
5：推荐的引物终浓度为 0.2μM，可在 0.1-1μM 范围内优化。
2：本制品含Super Green I 强光下易分解，降低灵敏度，使用时避免长时间强光照射本制品。
3：建议在冰上配制PCR反应液，再放入PCR仪器中扩增。可以提高扩增特异性，减少背景。
4：使用前上下颠倒轻轻混匀 Mix，请勿涡旋振荡混匀，避免产生过多气泡。
5：推荐的引物终浓度为 0.2μM，可在 0.1-1μM 范围内优化。
UN码：
HazardClass：
危害声明：
安全说明：
搜索质检报告(COA)
参考文献 & 客户发表文献
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
