中文名称: SafeStain核酸染料
英文名称: SafeStain Nucleic Acid GelStain
CAS No:
PS1317 SafeStain核酸染料 兼容Red和Green,10,000× in H2O (psaitong)
操作步骤:
一:胶染法(推荐方法,用法类似EB)
制胶时加入SafeStain核酸染料(染料灵敏,每100mL 琼脂糖溶液中加入10μL SafeStain原装液即可)。 按常规方法电泳。
自备材料:质粒DNA,DNA marker(国产的DNA marker浓度太高,至少稀释2~3倍后使用!);TBE缓冲液;TAE缓冲液;溴酚蓝指示剂;1%的西班牙琼脂糖凝胶;电泳仪(130v);移液器(0.5-10ul),凝胶成像仪。
实验步骤
1:制胶:将0.5g琼脂糖溶于50mL 1X TBE电泳缓冲液中,加热至琼脂糖完全融化。将融好的琼脂糖溶液室温放置50℃左右加入5ul的SafeStain凝胶电泳染料,摇匀。
2:倒胶:将制好的琼脂糖凝胶缓慢倒于制胶托盘内,避免产生气泡。将点样梳子垂直置于电泳胶膜的一端,距离托盘底部约1mm。放置时尽量保持平稳,切勿晃动。
3:置胶:待约30分钟左右胶体充分凝固后,缓慢垂直向上拔起点样梳子,切勿用力过猛。(夏季适当延长凝胶时间)
4:将琼脂糖凝胶放入电泳槽内,加入电泳缓冲液,使电泳缓冲液液面高于凝胶面约1-2mm。
5:将混合溴酚蓝指示剂的DNA样本(1ul溴酚蓝与2ul DNA标本混合)加入到点样孔内。
6:盖上电泳槽盖,开启电源,使DNA从负极移向正极恒压电泳(电压恒定在120~130v之间,一般可选择130V)。
7:当DNA条带距离点样孔约1-2cm后关闭电源,(约30-40分钟)取出凝胶。
8:用 302nm 激发的 UV 凝胶成像系统观察结果。
此方法染色染料用量相对较少。染料加入胶中可直接使用微波炉加热,制好的胶溶液可以在室温下保存直至用完。
二:泡染法 1:按照常规方法进行电泳。(用于胶回收等DNA高浓度的样品实验强烈推荐泡染的方法!)
2:用H2O将SafeStain 10,000× 储液稀释约1万倍到0.1M NaCl溶液中,制成1×染色液。(例如将5μL SafeStain 10,000× 原液加入到50mL 0.1M NaCl溶液中)。
3:将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中。缓慢加入足量的1× 染色液浸没凝胶。室温振荡染色30min左右,最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含3.5-10%丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于30min到1h,并随丙烯酰胺含量增加而延长。
4:用 302nm 激发的 UV 凝胶成像系统或者蓝光仪下观察结果。
用泡染法染色时,染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右;1× SafeStain®染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。
三:核酸电泳的PAGE步骤:Page胶实验室灯光下,肉眼可观测条带,不需要外源激发光(包括紫外和蓝光)。 1:将TBE制备的凝胶放入电泳槽中,用夹子夹住边缘。
2:用配置凝胶溶液同一批次的5×TBE灌满缓冲液槽。用注射器排除凝胶底部的气泡。
3:用注射器吸取1×TBE冲洗加样孔。将DNA样品和适量的6×凝胶上样缓冲液混合,用微量移液管加入加样孔。
4:将电极与电源相连(正极接下槽),打开电源一般90V;1-8V/cm。进行电泳9h。
5:电泳至标准参照染料迁移至所需位置(一般是电泳到二甲苯完全迁出,溴酚蓝距底边2~3cm停止)。关闭电源,拔掉插头,弃去电泳槽中的电泳液。
6:将凝胶取下来放入,染色皿中,加1X SafeStain的1X缓冲液中的振荡染色30-60分,放置在紫外检测即可。
与琼酯糖凝胶不同,不能用预染或点染的方法;只能用泡染的方法显色,由于聚丙烯酰胺比较致密,染料不容易深入,显色效果没有琼酯糖凝胶好。
产品特点:
1:带形美观:完全克服了同类染料分不开大片段DNA的缺点,电泳条带清晰整齐美观。
2:方便观测:用手持紫外灯或者手持蓝光仪都可以随时观察电泳情况。
3:相对安全:独特油性大分子(分子量>1000)使其不能穿透细胞膜进入细胞,实验表明,在凝胶染色浓度下该染料的没有EB类似的诱变性,使用安全,可以代替致癌物溴化乙锭EB作为各种核酸电泳的染色剂。
4:完美兼容:兼容Red和Green,SafeStain同时适用于紫外成像仪/激光成像仪和蓝光仪!同时拥有EB和Sybr Green类似的光谱,无需改变滤光片及观察装置:标准EB滤光片或SYBR 滤光片都适用。
5:Page胶肉眼可观测条带(不需要激发光,包括紫外和蓝光)。
6:迁移率好:EB小分子很快跑出胶外,所以EB容易导致小DNA片段看不清,大分子SafeStain完全克服这一点。
7:定量准确:适用于核酸分子大小的确定和定量,EB对小DNA片段定量不准确。
8:染色均匀:电泳时染色均匀,整片胶的背景一样。EB会导致胶的整体背景不同,经常出现阴阳背景(胶的背景部分亮,另一部分暗);EB长时间、长距离的电泳,EB信号强度会相应下降。我们的大分子SafeStain完全克服这一点。
9:灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。
10:稳定性高:适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下在酸或碱缓冲液中稳定。
11:耐光性强:实验室的日常环境下可以常温放置24个月。
12:信噪比好:样品荧光信号强,背景信号低,肉眼可观测到亮度明显比EB强,EB会导致胶的整体背景稍微高些,经常出现阴阳背景。
13:操作简单:与EB用法完全一样,在预制胶和电泳过程中染料不降解;而电泳后染色过程也只需30 分钟且无需脱色或冲洗。
14:适用范围广:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。
保存条件:
室温 避光 两年
注意事项:
1:SafeStain同时适用于紫外成像仪,激光成像仪和蓝光仪,下观测的核酸电泳染料。
2:Page胶实验室灯光下,肉眼可观测条带, 不需要外源激发光(包括紫外和蓝光)。
3:为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
UN码:
HazardClass:
危害声明:
安全说明:
搜索质检报告(COA)
参考文献 & 客户发表文献

本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)

摩尔浓度计算公式

  • =
    *
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    *选择对应的单位 *空出希望得到的变量,填写另外两个变量

用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积

稀释公式

稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )

  • * = *

连续稀释计算器方程

  • 连续稀释

  • 初始浓度:
  • 稀释倍数:
  • 计算结果

  • C1=C0/X C1: LOG(C1):
    C2=C1/X C2: LOG(C2):
    C3=C2/X C3: LOG(C3):
    C4=C3/X C4: LOG(C4):
    C5=C4/X C5: LOG(C5):
    C6=C5/X C6: LOG(C6):
    C7=C6/X C7: LOG(C7):
    C8=C7/X C8: LOG(C8):