中文名称: | 线性化聚乙烯亚胺 | ||||
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英文名称: | Polyethylenimine, Linear | ||||
别名: | PEI转染试剂;线性聚乙烯亚胺 PEI | ||||
CAS No: | 26913-06-4 | 分子式: | (CH2CH2NH)N | ||
CAS No: | 26913-06-4 | ||||
分子式: | (CH2CH2NH)N |
产品简介:
Polyethylenimine Linear(PEI)溶液是由一种阳离子聚合物转染试剂,分子量25000,它能与核酸形成复合物,并使该复合物进入哺乳动物细胞。线性PEI转染试剂广泛适。该试剂可在含血清与抗生素的完全培养基中发挥作用,即使在有血清存在的情况下,它仍然能高效的将核酸导入细胞。实验操作简单,对大多数培养细胞都有较高的转染效率(用于常见细胞系,如HEK-293、HEK293T、Hep G2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等),并且细胞毒性较低。
操作步骤:
一.细胞铺板
提前一天将细胞种植在六孔板中,以转染时细胞密度在70%-80%为宜。
二:转染过程
1:在转染前2h,移除细胞上原有的培养基,换为新鲜的完全培养基。
2:将2ug质粒DNA用50uL无血清稀释液稀释,充分混匀制成DNA稀释液。
注意:无血清稀释液建议采用Opti-MEM或ddH2O
3:向DNA稀释液中直接加入4uL转染试剂,室温静置10-15min。转染复合物配制完成。
4:将转染复合物加入细胞培养基中,轻柔混匀。
5:继续培养24-48h,收取细胞进行鉴定或加入相应抗生素筛选稳定克隆。
6:使用本产品转染后一般在24h开始进入表达高峰期,36-48h达到表达高峰,相对于脂质体转染试剂,达到峰值的时间延后约6-12h。
不同细胞培养容器转染用量:
提前一天将细胞种植在六孔板中,以转染时细胞密度在70%-80%为宜。
二:转染过程
1:在转染前2h,移除细胞上原有的培养基,换为新鲜的完全培养基。
2:将2ug质粒DNA用50uL无血清稀释液稀释,充分混匀制成DNA稀释液。
注意:无血清稀释液建议采用Opti-MEM或ddH2O
3:向DNA稀释液中直接加入4uL转染试剂,室温静置10-15min。转染复合物配制完成。
4:将转染复合物加入细胞培养基中,轻柔混匀。
5:继续培养24-48h,收取细胞进行鉴定或加入相应抗生素筛选稳定克隆。
6:使用本产品转染后一般在24h开始进入表达高峰期,36-48h达到表达高峰,相对于脂质体转染试剂,达到峰值的时间延后约6-12h。
不同细胞培养容器转染用量:
细胞培养容器 | 表面积 | 稀释液体积 | DNA的量 | 转染试剂的量 | 培养基总量 |
96-well | 0.3cm2 | 10uL | 0.1ug | 0.1uL | 100uL |
48-well | 0.7cm2 | 20uL | 0.2ug | 0.3uL | 200uL |
24-well | 1.9cm2 | 50uL | 0.5ug | 1uL | 500uL |
12-well | 3.8cm2 | 50uL | 1ug | 2uL | 1mL |
6-well/35mmdish | 10cm2 | 100uL | 2ug | 4uL | 2mL |
60mm dish/T25flask | 21cm2 | 200uL | 4ug | 8uL | 4mL |
100mm dish/T75flask | 58cm2 | 500uL | 10ug | 20uL | 10mL |
保存条件:
-20°C ,6个月
注意事项:
1:本产品对细胞非常温和,一般情况下转染后无需进行换液操作。
2:为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2:为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
UN码:
HazardClass:
危害声明:
安全说明:
搜索质检报告(COA)
参考文献 & 客户发表文献
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )