产品简介：
一种新型的阳离子脂质体转染试剂。适合于将核酸(DNA和RNA)转染⼊真核细胞，具有低细胞毒性；对多种类型的细胞和培养板都具有高转染效率；转染时血清的存在不影响转染效率的优点。
适用范围：贴壁细胞和悬浮细胞（哺乳动物细胞系）的转染。
对于大多数细胞来说，DNA(µg)与转染试剂2000 (µl)的比例为1:2-1:3。转染时高的细胞密度可以得到高的转染效率和表达水平 ，并能减少细胞毒性。
适用范围：贴壁细胞和悬浮细胞（哺乳动物细胞系）的转染。
对于大多数细胞来说，DNA(µg)与转染试剂2000 (µl)的比例为1:2-1:3。转染时高的细胞密度可以得到高的转染效率和表达水平 ，并能减少细胞毒性。
操作步骤：
质粒 DNA 的转染：
对于大多数细胞来说，DNA(µg)与转染试剂2000 (µl)的比例为1:2-1:3。转染时高的细胞密度可以得到高的转染效率和表达水平 ，并能减少细胞毒性。
一．以24孔板为例
贴壁细胞：转染前⼀天，用500µl不含抗生素的培养基接种0.5-2×10⁵ 细胞，使之第二天能达到70-90%汇合。
悬浮细胞：在准备DNA-转染试剂2000复合物之前，用500 µl不含抗⽣素的培养基接种 4-8×10⁵ 细胞即可。
二．对每个转染样品，进行以下操作 >
1、在eppendorf管里分别加入50 µl Opti-MEM I ReLipced Serum Medium和0.8µg DNA轻柔混匀，制成DNA稀释液。
2、在另一个eppendorf管里分别加入50µl Opti-MEMI ReLipced Serum Medium和2.0 µl转染试剂2000(注意用前先混匀)， 轻柔混匀，制成转染试剂2000稀释液，室温静置5分钟。
3、将DNA稀释液和转染试剂2000稀释液混合，轻柔混匀，室温静置20分钟， 形成DNA-染试剂2000复合物。DNA-染试剂2000复合物在室温下可稳定存在6小时。
三． 将DNA-转染试剂2000复合物加入到接种好的细胞中，将培养板轻轻地前后摇动，使复合物分散均匀。
四．在37℃ CO2培养箱中培养4-6小时后更换培养基,继续培养18-48⼩时。
五. 如果要筛选稳定细胞株，则在转染24小时后将细胞按照1:10或更高的比例接种到新鲜培养基中，第二天加入选择性培养基进行筛选。
质粒DNA转染的优化为达到最高的转染效率和降低细胞毒性的影响，可以对DNA和转染试剂2000的比例以及细胞密度进行优化 ，一般在1:0.5-1:5的范围内优化DNA (µg)和转染试剂2000 (µl) 的比例。
不同细胞培养板中转染时培养基、核酸及转染试剂2000用量
转染试剂2000用于不同细胞转染时用量参考（以 96 孔板为例）
常见细胞的转染效率（仅供参考，实验条件不同转染效率会有差别）
对于大多数细胞来说，DNA(µg)与转染试剂2000 (µl)的比例为1:2-1:3。转染时高的细胞密度可以得到高的转染效率和表达水平 ，并能减少细胞毒性。
一．以24孔板为例
贴壁细胞：转染前⼀天，用500µl不含抗生素的培养基接种0.5-2×10⁵ 细胞，使之第二天能达到70-90%汇合。
悬浮细胞：在准备DNA-转染试剂2000复合物之前，用500 µl不含抗⽣素的培养基接种 4-8×10⁵ 细胞即可。
二．对每个转染样品，进行以下操作 >
1、在eppendorf管里分别加入50 µl Opti-MEM I ReLipced Serum Medium和0.8µg DNA轻柔混匀，制成DNA稀释液。
2、在另一个eppendorf管里分别加入50µl Opti-MEMI ReLipced Serum Medium和2.0 µl转染试剂2000(注意用前先混匀)， 轻柔混匀，制成转染试剂2000稀释液，室温静置5分钟。
3、将DNA稀释液和转染试剂2000稀释液混合，轻柔混匀，室温静置20分钟， 形成DNA-染试剂2000复合物。DNA-染试剂2000复合物在室温下可稳定存在6小时。
三． 将DNA-转染试剂2000复合物加入到接种好的细胞中，将培养板轻轻地前后摇动，使复合物分散均匀。
四．在37℃ CO2培养箱中培养4-6小时后更换培养基,继续培养18-48⼩时。
五. 如果要筛选稳定细胞株，则在转染24小时后将细胞按照1:10或更高的比例接种到新鲜培养基中，第二天加入选择性培养基进行筛选。
质粒DNA转染的优化为达到最高的转染效率和降低细胞毒性的影响，可以对DNA和转染试剂2000的比例以及细胞密度进行优化 ，一般在1:0.5-1:5的范围内优化DNA (µg)和转染试剂2000 (µl) 的比例。
不同细胞培养板中转染时培养基、核酸及转染试剂2000用量
| 细胞培养板 | 每孔面积 | 培养基用量 | DNA转染 | siRNA | |||
| 铺板培养基用量 | 稀释培养基用量 | ||||||
| 96-well | 0.3 cm2 | 100 ul | 2 × 25 µl | 0.2 µg | 0.5 µl | 5 pmol | 0.25 µl |
| 24-well | 2 cm2 | 500 ul | 2 × 50 µl | 0.8 µg | 2.0 µl | 20 pmol | 1.0 µl |
| 12-well | 4 cm2 | 1 ml | 2 × 100 µl | 1.6 µg | 1.6 µg | 40 pmol | 2.0 µl |
| 6-well | 10 cm2 | 2 ml | 2 × 250 µl | 4.0 µg | 10 µl | 100 pmol | 5 µl |
| 60-mm | 20 cm2 | 5 ml | 2 × 0.5 ml | 8.0 µg | 20 µl | 200 pmol | 10 µl |
| 10-cm | 60 cm2 | 15 ml | 2 × 1.5 ml | 24 µg | 60 µl | 600 pmol | 30 µl |
转染试剂2000用于不同细胞转染时用量参考（以 96 孔板为例）
| 细胞型号 | 培养基 | 每孔细胞数 | DNA的量 | 转染试剂量 |
| 293H | DMEM | 3×104 | 0.2μg | 0.5μL |
| 293FT | DMEM | 3×104 | 0.2μg | 0.5μL |
| 293E | DMEM | 3×104 | 0.2μg | 0.5μL |
| 293F | DMEM | 3×104 | 0.2μg | 0.5μL |
| COS7 | DMEM | 1.5×104 | 0.4μg | 0.5μL |
| hela | DMEM | 2×104 | 0.3μg | 0.5μL |
| Caco2 | DMEM | 3.5×104 | 0.3μg | 0.75μL |
| BHK21 | DMEM | 2×104 | 0.2μg | 0.5μL |
| CHO-DG44 | DMEM+HT+pro | 2×104 | 0.5μg | 0.5μL |
| RAW264.7 | DMEM | 3×104 | 0.2μg | 0.5μL |
| MCF7 | MEM/NEAA+0.01mg/ml insulin+sodium pyruvat | 2×104 | 0.1μg | 0.25μL |
| SW480 | IMDM | 3×104 | 0.4μg | 0.5μL |
| MDCK | DMEM | 4×104 | 0.6μg | 1μL |
| CHO-K1 | IMDM+Pro | 3×104 | 0.2μg | 0.5μL |
| HepG2 | DMEM | 3×104 | 0.5μg | 0.75μL |
| A549 | DMEM | 2×104 | 0.3μg | 0.5μL |
| NIH/3T3 | DMEM | 1.5×104 | 0.1μg | 0.75μL |
| vero | DMEM | 3×104 | 0.3μg | 0.75μL |
| Sf9 | SIM SF | 5×104 | 0.4μg | 0.75μL |
常见细胞的转染效率（仅供参考，实验条件不同转染效率会有差别）
| 细胞种类 | HEK293 | HCT 116 | WRL - 68 | HepG2 | NIH/3T3 | THP-1 | Hela | MCF-7 | 293T | TS cell | HO1980 | A549 | ||
| 转染效率 | >80% | >80% | ~80% | ~80% | ~80% | >50% | >80% | >80% | >80% | >60% | >60% | >80% | ||
| 细胞种类 | MEF | Chok1 | Hep3B | C2C12 | Neuro- 2a | HUVEC | MDCK | Hep2C | WEHI | B50 | Calu1 | L929 | ||
| 转染效率 | >50% | >50% | >80% | >80% | >70% | >80% | >80% | >80% | >80% | >70% | >70% | >70% | ||
保存条件：
2-8℃ 避光
注意事项：
1、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2、以上信息仅做参考交流之用。
2、以上信息仅做参考交流之用。
UN码：
HazardClass：
危害声明：
安全说明：
搜索质检报告(COA)
参考文献 & 客户发表文献
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
