中文名称: | PF 5274857 | ||||
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英文名称: | PF 5274857 | ||||
别名: | 1-(4-(5-Chloro-4-(3,5-dimethylpyridin-2-yl)pyridin-2-yl)piperazin-1-yl)-3-(methylsulfonyl)propan-1-one;PF-5274857 freebase;1-[4-[5-chloro-4-(3,5-dimethylpyridin-2-yl)pyridin-2-yl]piperazin-1-yl]-3-methylsulfonylpropan-1-one | ||||
CAS No: | 1373615-35-0 | 分子式: | C20H25ClN4O3S | 分子量: | 436.96 |
CAS No: | 1373615-35-0 | ||||
分子式: | C20H25ClN4O3S | ||||
分子量: | 436.96 | ||||
MDL: | MFCD22420827 |
包装规格:
2mg 5mg 10mg 50mg 100mg in glass bottle
产品简介:
一种有效的、选择性的、具有口服活性和可透过血脑屏障的 Smo 拮抗剂,IC50 值为 5.8 nM,Ki 值为 4.6 nM。PF-5274857 有潜力用于包括激活的 Hh 途径驱动的脑肿瘤和脑转移在内的多种肿瘤的研究。
溶解性:
DMSO :125 mg/mL (286.07 mM; 超声助溶)
Water:< 0.1 mg/mL (insoluble)
Water:< 0.1 mg/mL (insoluble)
储备液保存:
-80°C, 2 years
-20°C, 1 year
-20°C, 1 year
体内实验:
1、请依序添加每种溶剂:10% DMSO→40% PEG300→5% Tween-80→45% Saline
Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (4.76 mM); 澄清溶液
此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL(饱和度未知)的澄清溶液。
以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀;再向上述体系中加入 50 μL Tween-80,混合均匀;然后再继续加入 450 μL 生理盐水 定容至 1 mL。
2、请依序添加每种溶剂:10% DMSO→90% (20% SBE-β-CD in Saline)
Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (4.76 mM); 澄清溶液
此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL(饱和度未知)的澄清溶液。
以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液 中,混合均匀。
3、请依序添加每种溶剂:10% DMSO→90% Corn Oil
Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (4.76 mM); 澄清溶液
此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL(饱和度未知)的澄清溶液,此方案实验周期在半个月以上的动物实验酌情使用。
以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL玉米油中,混合均匀。
<1mg/ml表示微溶或不溶。
普西唐提供的所有化合物浓度为内部测试所得,实际溶液度可能与公布值有所偏差,属于正常的批间细微差异现象。
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;⼀旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (4.76 mM); 澄清溶液
此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL(饱和度未知)的澄清溶液。
以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀;再向上述体系中加入 50 μL Tween-80,混合均匀;然后再继续加入 450 μL 生理盐水 定容至 1 mL。
2、请依序添加每种溶剂:10% DMSO→90% (20% SBE-β-CD in Saline)
Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (4.76 mM); 澄清溶液
此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL(饱和度未知)的澄清溶液。
以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液 中,混合均匀。
3、请依序添加每种溶剂:10% DMSO→90% Corn Oil
Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (4.76 mM); 澄清溶液
此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL(饱和度未知)的澄清溶液,此方案实验周期在半个月以上的动物实验酌情使用。
以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL玉米油中,混合均匀。
<1mg/ml表示微溶或不溶。
普西唐提供的所有化合物浓度为内部测试所得,实际溶液度可能与公布值有所偏差,属于正常的批间细微差异现象。
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;⼀旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
靶点:
IC50: 5.8 nM (Smo); Ki: 4.6 nM (Smo)
体外研究:
PF-5274857 completely inhibits Shh-induced Hh pathway activity with an IC50 of 2.7±1.4 nM measured by the transcriptional activity of Smo downstream gene Gli1 in MEF cells.
PF-5274857 shows less than 20% inhibition against a broad panel of protein kinases at 1 μM.
PF-5274857 shows less than 20% inhibition against a broad panel of protein kinases at 1 μM.
体内研究:
PF-5274857 (1-30 mg/kg; p.o. once daily for 6 days) shows robust antitumor efficacy and correlation between PK and PD in medulloblastoma allograft mice models.
PF-5274857 (10 mg/kg; i.h.) in the plasma is able to cross the blood-brain barrier in rats within 4 hours postdose.
PF-5274857 (10-100 mg/kg; p.o. once daily for 4 days) is able to target Smo in the brain leading to the downregulation of Hh pathway activity in the brain tumor.
PF-5274857 (30 mg/kg; p.o. once daily for 34 days) increases the survival rates of primary Ptch+/− p53−/− medulloblastoma mice.
PF-5274857 (5-30 mg/kg; p.o.) exhibits the apparent volume of distribution of 5.6±0.5 L/kg and the half-life (T1/2) of 1.7±0.1 hours.
PF-5274857 (10 mg/kg; i.h.) in the plasma is able to cross the blood-brain barrier in rats within 4 hours postdose.
PF-5274857 (10-100 mg/kg; p.o. once daily for 4 days) is able to target Smo in the brain leading to the downregulation of Hh pathway activity in the brain tumor.
PF-5274857 (30 mg/kg; p.o. once daily for 34 days) increases the survival rates of primary Ptch+/− p53−/− medulloblastoma mice.
PF-5274857 (5-30 mg/kg; p.o.) exhibits the apparent volume of distribution of 5.6±0.5 L/kg and the half-life (T1/2) of 1.7±0.1 hours.
激酶实验:
生化分析:过表达人源Smo (氨基酸181-787)的HEK293细胞培养在含有10% FBS, Pen–Strep以及 0.1 mg/mL 潮霉素的DMEM培养基中,直到90%密度。用冷的PBS洗过之后, 将细胞用膜制备缓冲液重悬均匀,缓冲液成分包含50 mM Tris-HCl, pH 7.5, 250 mM 蔗糖含有Roche完全蛋白酶鸡尾酒。将上述匀浆离心并用分析缓冲液重悬细胞,分析缓冲液包含50 mM Tris-HCl, pH 7.5, 100 mM NaCl, 25 mM MgCl2, 1 mM EDTA, 和0.1%无蛋白酶BSA,然后在玻璃组织研磨机中使之均匀。含有Smo的总蛋白利用Pierce BCA蛋白分析法来测定。对于竞争性结合实验分析,加入100 μL 分析缓冲液到96孔GF/B 滤板,进行10分钟的滤板预湿润然后去掉。然后加入20 μL 分析缓冲液, 10μL药物的连续稀释液, 20 μL 3H-Smo 拮抗剂 (终浓度3 nM)和50 μL 膜制备品(含有40 μg 总蛋白)。滤板在室温孵育2小时,洗过之后真空晾干。然后滤板在60°C 烘箱中干燥1小时,加入 45 μL Microscint 20,室温孵育30 分钟到1小时, 然后用TopCount闪烁记数器计数。数据用GraphPad Prism软件进行分析。
细胞实验:
细胞系:Gli-Luc/MEF 细胞
浓度:50 pM- 3 μM
处理时间:48 小时
方法:Gli-Luc/MEF细胞培养在含有10%热失活FBS, 2mM l-glutamine和0.55 mM β-mercaptoethanol 的DMEM培养基中直到90%细胞密度。第一天, 胰酶消化后的细胞按每孔7,500个接种在白色384孔板中,每孔加入20 μL含有1% 热失活FBS和1 mM 丙酮酸钠的OptiMEM 培养基。平板在37°C和5% CO2环境中培养过夜。第2天, 加入3 μM到50pM的PF-5274857 ,按照3倍连续稀释,然后加入重组鼠源Sonic Hedgehog,终浓度2μg/mL。在37°C,5% CO2条件下细胞与PF-5274857和Shh孵育48小时。第四天利用Bright-Glo 荧光素酶分析系统进行荧光素酶分析。简言之, 每孔培养基中加入25 μL Bright-Glo荧光素酶试剂。室温孵育5分钟然后酶标仪检测数据然后计算PF-5274857的IC50值。
浓度:50 pM- 3 μM
处理时间:48 小时
方法:Gli-Luc/MEF细胞培养在含有10%热失活FBS, 2mM l-glutamine和0.55 mM β-mercaptoethanol 的DMEM培养基中直到90%细胞密度。第一天, 胰酶消化后的细胞按每孔7,500个接种在白色384孔板中,每孔加入20 μL含有1% 热失活FBS和1 mM 丙酮酸钠的OptiMEM 培养基。平板在37°C和5% CO2环境中培养过夜。第2天, 加入3 μM到50pM的PF-5274857 ,按照3倍连续稀释,然后加入重组鼠源Sonic Hedgehog,终浓度2μg/mL。在37°C,5% CO2条件下细胞与PF-5274857和Shh孵育48小时。第四天利用Bright-Glo 荧光素酶分析系统进行荧光素酶分析。简言之, 每孔培养基中加入25 μL Bright-Glo荧光素酶试剂。室温孵育5分钟然后酶标仪检测数据然后计算PF-5274857的IC50值。
动物实验:
动物模型:携带原发性Ptch+/−p53+/−或Ptch+/−p53−/−髓母细胞瘤肿瘤的 SCID-beige 小鼠
剂量:0 mg/kg, 1 mg/kg, 5 mg/kg, 10 mg/kg和30 mg/kg
给药处理:口服
剂量:0 mg/kg, 1 mg/kg, 5 mg/kg, 10 mg/kg和30 mg/kg
给药处理:口服
保存条件:
-20°C
注意事项:
1、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2、以上信息仅做参考交流之用。
2、以上信息仅做参考交流之用。
UN码:
HazardClass:
危害声明:
安全说明:
搜索质检报告(COA)
参考文献 & 客户发表文献
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )