| 中文名称: | GSK2334470 | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| 英文名称: | GSK2334470 | ||||
| 别名: | GSK2334470 抑制剂;GSK2334470 国华试剂 (3S,6R)-1-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-yl)-2-(methylamino)pyrimidin-4-yl]-N-cyclohexyl-6-methylpiperidine-3-carboxamide | ||||
| CAS No: | 1227911-45-6 | 分子式: | C25H34N8O | 分子量: | 462.59 |
| CAS No: | 1227911-45-6 | ||||
| 分子式: | C25H34N8O | ||||
| 分子量: | 462.59 | ||||
产品简介：
一种高效特异性的PDK1抑制剂，IC50值为10nM。
溶解性：
溶于DMSO(≥50mg/mL）
储备液保存：
-80°C, 2 years
-20°C, 1 year
-20°C, 1 year
体内实验：
1、请依序添加每种溶剂： 10% DMSO→40% PEG300→5% Tween-80→45% Saline
Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (5.40 mM); 澄清溶液
此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液。
以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀；再向上述体系中加入 50 μL Tween-80，混合均匀；然后再继续加入 450 μL 生理盐水 定容至 1 mL。
2、请依序添加每种溶剂： 10% DMSO→90% (20% SBE-β-CD in Saline)
Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (5.40 mM); 澄清溶液
此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液。
以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液 中，混合均匀。
3、请依序添加每种溶剂： 10% DMSO→90% Corn Oil
Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (5.40 mM); 澄清溶液
此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液，此方案实验周期在半个月以上的动物实验酌情使用。
以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL玉米油中，混合均匀。
＜1mg/ml表示微溶或不溶。
普西唐提供的所有化合物浓度为内部测试所得，实际溶液度可能与公布值有所偏差，属于正常的批间细微差异现象。
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (5.40 mM); 澄清溶液
此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液。
以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀；再向上述体系中加入 50 μL Tween-80，混合均匀；然后再继续加入 450 μL 生理盐水 定容至 1 mL。
2、请依序添加每种溶剂： 10% DMSO→90% (20% SBE-β-CD in Saline)
Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (5.40 mM); 澄清溶液
此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液。
以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液 中，混合均匀。
3、请依序添加每种溶剂： 10% DMSO→90% Corn Oil
Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (5.40 mM); 澄清溶液
此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液，此方案实验周期在半个月以上的动物实验酌情使用。
以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL玉米油中，混合均匀。
＜1mg/ml表示微溶或不溶。
普西唐提供的所有化合物浓度为内部测试所得，实际溶液度可能与公布值有所偏差，属于正常的批间细微差异现象。
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
靶点：
IC50: 10 nM(PDK1)
体外研究：
小分子 GSK2334470 以 ~10 nM 的 IC50 抑制 PDK1，但在浓度高 500 倍时不抑制 93 种其他蛋白激酶的活性，包括 13 种与 PDK1 最相关的 AGC 激酶。添加 GSK2334470 可消除由血清或 IGF-1 (胰岛素样生长因子 1) 诱导的 T 环残基磷酸化和 SGK 亚型和 S6K1 的激活。GSK2334470 和 AZD8055 分别有效抑制 PDK1 和 mTOR 的磷酸化，并在 LAN-1-MK 中诱导比 LAN-1 更高的 G0-G1 比率。PDK1和mTOR抑制剂影响部分耐药亚系 GSK3β的磷酸化。
体内研究：
PDK1 抑制剂 (PDKi) GSK2334470 的功效在新生BrafV600E:Pten/ 小鼠身上进行了测试，这些小鼠接受了 4-HT 全身给药。每周两次给药 PDK1 可显著抑制色素病变和伴随的黑色素瘤形成，并可通过 H&E 染色定量，观察到它显著抑制肺转移(~80%)，S100 免疫染色可观察到它明显抑制淋巴结转移，与 Pdk1 基因消融后的表型相似。
激酶实验：
激酶活性检测：
使用3 μg-5 μg指定抗体，从0.1 mg 到1 mg 细胞裂解液中获得的内源性Akt，S6K和RSK在振动台上在4°C下进行免疫沉淀2小时。SGK活性测定中，150 μg转染的细胞裂解液与5 μg谷胱甘肽琼脂糖在4°C下温育3小时。使用含0.5 mM NaCl的裂解缓冲洗涤免疫沉淀物两次，然后使用激酶缓冲液洗涤两次。加入反应混合物开始激酶反应，使反应组分的终浓度为0.1 mM [γ-32P]ATP(200 c.p.m./pmol), 5 mM Mg(Ac)2, 0.1% 2-巯基乙醇和 30 mM Crosstide肽 (GRPRTSSFAEGKK)。反应在振动台上30°C下进行20分钟，然后转移到P81磷酸纤维素纸，终止反应。在磷酸中洗涤磷酸纤维素纸，在丙酮中漂洗，再晾干，进行Cerenkov计数。1小时内催化1 nmol [32P]磷酸盐渗透到底物定义为一单元活性。
使用3 μg-5 μg指定抗体，从0.1 mg 到1 mg 细胞裂解液中获得的内源性Akt，S6K和RSK在振动台上在4°C下进行免疫沉淀2小时。SGK活性测定中，150 μg转染的细胞裂解液与5 μg谷胱甘肽琼脂糖在4°C下温育3小时。使用含0.5 mM NaCl的裂解缓冲洗涤免疫沉淀物两次，然后使用激酶缓冲液洗涤两次。加入反应混合物开始激酶反应，使反应组分的终浓度为0.1 mM [γ-32P]ATP(200 c.p.m./pmol), 5 mM Mg(Ac)2, 0.1% 2-巯基乙醇和 30 mM Crosstide肽 (GRPRTSSFAEGKK)。反应在振动台上30°C下进行20分钟，然后转移到P81磷酸纤维素纸，终止反应。在磷酸中洗涤磷酸纤维素纸，在丙酮中漂洗，再晾干，进行Cerenkov计数。1小时内催化1 nmol [32P]磷酸盐渗透到底物定义为一单元活性。
保存条件：
-20℃
注意事项：
1、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2、以上信息仅做参考交流之用。
2、以上信息仅做参考交流之用。
UN码：
HazardClass：
危害声明：
安全说明：
搜索质检报告(COA)
参考文献 & 客户发表文献
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
