中文名称: | 赫斯特荧光染料 33258 热销 | ||||
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英文名称: | BisBenzimide H 33258 | ||||
别名: | 赫斯特33258 Hoechst 33258 | ||||
CAS No: | 23491-45-4 | 分子式: | C25H24N6O.3HCl | 分子量: | 533.88 |
CAS No: | 23491-45-4 | ||||
分子式: | C25H24N6O.3HCl | ||||
分子量: | 533.88 | ||||
MDL: | MFCD00150076 | EINEC: | 245-690-6 | ||
EINEC: | 245-690-6 |
熔点:
314°C
密度:
1.6930g/cm3
包装规格:
25mg 100mg 500mg 1g in glass bottle
产品简介:
荧光色素;用于DNA、染色体和核酸的染色;荧光染色法和免疫荧光技术。Hoechst 33258 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,它在嵌入双链 DNA 后释放强烈的蓝色荧光,对细胞的毒性较低。Hoechst 33258 常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测,也可以用于普通的细胞核染色,或常规的DNA染色。
细胞遗传学研究的常用试剂,荧光染色细胞的DNA ,插入DNA的A-T区,具有低的细胞毒性,形成膜渗透性荧光DNA链。
用于细胞核染色时,推荐的Hoechst 33258工作浓度为0.5-10μg/ml。
细胞遗传学研究的常用试剂,荧光染色细胞的DNA ,插入DNA的A-T区,具有低的细胞毒性,形成膜渗透性荧光DNA链。
用于细胞核染色时,推荐的Hoechst 33258工作浓度为0.5-10μg/ml。
溶解性:
溶于水(10mg/ml)
储备液保存:
-80°C, 6 months
-20°C, 1 month
(sealed storage, away from moisture and light)
-20°C, 1 month
(sealed storage, away from moisture and light)
操作步骤:
一:配置母液
Hoechst 33258溶于水,溶解度可达10mg/ml。因此可配制成10mg/ml的母液于-20℃避光保存
二:使用方法
1、用PBS或合适的缓冲液制备10~50µM Hoechst 33258染色液。
2、固定的细胞或组织染色:
对于固定的细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst33258染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的Hoechst 33258染色。
(1)对于贴壁细胞或组织切片:加入适量Hoechst 33258染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞:至少加入待测染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5分钟。
(2)吸除Hoechst 33258染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。
(3)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm,发射波长460nm。
3、活细胞或组织染色:
(1)细胞培养物中加入适量Hoechst 33258染色液,约1/10细胞培养基体积,必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液,对于96孔板一个孔需加入100μl染色液。
(2)在 37℃培养细胞 10~20 分钟。
(3)用 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
(4)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm,发射波长460nm。
Hoechst 33258溶于水,溶解度可达10mg/ml。因此可配制成10mg/ml的母液于-20℃避光保存
二:使用方法
1、用PBS或合适的缓冲液制备10~50µM Hoechst 33258染色液。
2、固定的细胞或组织染色:
对于固定的细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst33258染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的Hoechst 33258染色。
(1)对于贴壁细胞或组织切片:加入适量Hoechst 33258染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞:至少加入待测染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5分钟。
(2)吸除Hoechst 33258染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。
(3)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm,发射波长460nm。
3、活细胞或组织染色:
(1)细胞培养物中加入适量Hoechst 33258染色液,约1/10细胞培养基体积,必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液,对于96孔板一个孔需加入100μl染色液。
(2)在 37℃培养细胞 10~20 分钟。
(3)用 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
(4)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm,发射波长460nm。
保存条件:
-20℃ 避光
注意事项:
1、Hoechst 33258 对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
2、荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
3、为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
5、以上信息仅做参考交流之用。
2、荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
3、为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
5、以上信息仅做参考交流之用。
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参考文献 & 客户发表文献
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质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )